顯微鏡物像是否清楚不僅決定于放大倍數,還與顯微鏡的分辨力(resolution)有關,分辨力是指顯微鏡(或人的眼睛距目標25cm處)能分辨物體最小間隔的能力,分辨力的大小決定于光的波長和數值孔徑(又稱:鏡口率)以及介質的折射率,用公式表示為:
顯微鏡的分辨力: R=0.61λ /NA
NA=nSin α/2 (數值孔徑)
式中: λ 為成像光線的波長;
n = 標本和物鏡之間介質折射率;
α = 鏡口角(標本對物鏡鏡口的張角) ;
NA = 數值孔徑(numeric aperture)。
鏡口角總是要小于180?,所以Sin α /2 的最大值必然小于1 。
介質的折射率n:
介質 |
空氣 |
水 |
香柏油 |
α溴萘 |
折射率 |
1 |
1.33 |
1.515 |
1.66 |
制作光學鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78,所用介質的折射率越接近玻璃的越好。 對于干燥物鏡來說,介質為空氣,數值孔徑一般為0.05~0.95;油鏡頭用香柏油為介質,數值孔徑可接近1.5。