本文標(biāo)題:"細菌總數(shù)是通過特定稀釋出現(xiàn)的菌落數(shù)計算出來的"
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細菌總數(shù)是通過特定稀釋出現(xiàn)的菌落數(shù)計算出來的
平板法
稀釋或濃縮后,將樣品加到已注入混合了選擇性營養(yǎng)物的瓊脂生長培養(yǎng)基的
培養(yǎng)皿中。把稀釋試樣加入生長培養(yǎng)基中一般有兩種不同方法:在涂布平板法
(spread plate method)中,用無菌玻璃棒把0.lml選擇好稀釋度的樣品稀釋液均
勻涂布到固體瓊脂上。另一種方法,傾注平板法(pour plate method)
側(cè)E1ml的樣品稀釋液與熔化的瓊脂(45℃)在培養(yǎng)皿中混合且凝固
涂布平板技術(shù)的優(yōu)點在于能使菌種在瓊脂表面生長,這樣,可以根據(jù)形
態(tài)較容易區(qū)分不同微生物,而且它還有利于菌落分離。通常,涂布平板法得到的
細菌數(shù)目比傾注平板法的多(接種相同的體積),或許因為涂布平板法的通氣效
果好并能使細菌的團塊解聚。
培養(yǎng)平板制成后,樣品在特定條件下培養(yǎng),細菌繁殖形成肉眼可見、分離的
菌落,這些菌落也稱為菌落形成單位(CFU )。由于假設(shè)每個菌落形成單位起源
于一個單獨的細菌細胞,所以制作培養(yǎng)平板之前的稀釋過程把生物分開成離散再
生單位是至關(guān)重要的,然而,實際上菌落可能源自細菌鏈或細菌團,導(dǎo)致低估了
真正的細菌數(shù)目。細菌總數(shù)是通過特定稀釋出現(xiàn)的菌落數(shù)計算出來的。一個標(biāo)準(zhǔn)
直徑150mm的瓊脂培養(yǎng)平板可接受的菌落數(shù)范圍一般為30~300。低于30,則
準(zhǔn)確率降低;高于300,準(zhǔn)確率只是稍微偏高,事實上,培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)因為
擁擠及生長過程中平板上生物間的競爭而減少。
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