本文標(biāo)題："視頻光學(xué)/電子顯微鏡技術(shù)-生物圖像顯微鏡"
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相關(guān)的視頻光學(xué)/電子顯微鏡術(shù)
基本方案相關(guān)的視頻光學(xué)/電子顯微鏡術(shù)
這種方法采用免疫金染色法和免疫過氧化物酶染色法來(lái)做電鏡
標(biāo)本的染色。通常免疫金染色法常用來(lái)標(biāo)記絕大部分抗原;而免疫
過氧化物酶染色法通常僅用來(lái)標(biāo)記那些位于膜包被的小問隔內(nèi)的抗
原，這是因?yàn)檫^氧化物酶反應(yīng)生成的電子致密產(chǎn)物易從抗體結(jié)合處
彌散開只有采用免疫金染色法才能標(biāo)記位于胞質(zhì)內(nèi)的GFP融合蛋白
質(zhì)的抗原決定簇。此外，HRP(辣根過氧化物酶)標(biāo)記也適用于其他
的抗原決定簇.
值得一提的是，許多用免疫熒光顯示結(jié)果非常好的抗體在免疫
源性電鏡染色中不甚理想，因?yàn)樵诙鄶?shù)電鏡標(biāo)本的固定過程中用到
的戊二醛很容易與抗原決定簇中的氨基酸基團(tuán)橋聯(lián)到一起;然而，
若是減少或者不用戊二醛會(huì)造成細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的超微結(jié)構(gòu)無(wú)法很好
保存。如果免疫源性電鏡標(biāo)記行不通，可以采用一些調(diào)節(jié)手段，例
如，優(yōu)化固定過程中戊二醛的濃度或者換用高碘酸鹽、賴氨酸、多
聚甲醛固定
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