本文標題:"細胞計數(shù)-緩沖液細胞染色深受酸堿度(pH)的影響"
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細胞計數(shù)-緩沖液細胞染色深受酸堿度(pH)的影響
網(wǎng)織紅細胞計數(shù) 用注射器吸取骨髓液滴予煌焦油藍色膜上,
用玻片覆蓋;或?qū)⑼科V撬枰嘿N于煌焦油藍色膜上,上下翻
動,直至標本與色膜完全溶合混勻為止。10-30 min后,揭開玻片
,用性性質(zhì)。細胞核染色質(zhì)的核酸與強堿性的組蛋白、精蛋白等形
成核蛋白,這種強堿性物質(zhì)與賴特染料中的酸性染料伊紅有親和力
,故染成紅色;但核蛋白中還有少量的弱酸性蛋白及其氨基,又與
賴特染料中的美藍起作用,只因其量太少,而不顯藍色,故細胞核
呈紫紅色。較幼稚細胞之胞漿和細胞核之核仁含有酸性物質(zhì),與賴
特染液中的堿性染料美藍有親和力,故染成藍色;當酸堿物質(zhì)各半
時,則染成紅藍色或灰紅色,即所謂多嗜性。
緩沖液細胞染色深受酸堿度(pH)的影響。由于各細胞成分蛋
白質(zhì)的等電點不同,染色親和力也大不相同,蛋白質(zhì)在等電點之上
時,可和陽離子(如堿性染料美藍等)相結(jié)合;而在等電點之下時,
則和陰離子(如酸性染料伊紅等)相結(jié)合。當染色時,若染色液偏堿
性,則細胞著色偏藍;反之,染色液偏酸性時,則細胞著色較紅。
為使細胞染色良好,必須使染色液在一定的pH范圍內(nèi)染色,通常賴
特染液pH值以6.4.6.8為最佳。
沖洗:用自來水沖洗涂片上之染液。要輕輕搖動涂片,使染液
沉渣浮起沖走,切勿先傾去染液再用水沖;否則,涂片上的許多染
料將沉淀于涂膜上。沖洗時間不可過長,水沖力亦不可太大,以防
脫色或涂膜脫落。沖洗后之標本豎置在片架上,于空氣中自然干燥
,或用潔凈吸水紙將水吸于。
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