本文標題:"生物細胞膜的微生物分析圖像顯微鏡"
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生物細胞膜的微生物分析圖像顯微鏡
迄今為止,在自然界中存在的微生物,被人們分離研究的僅占很小一
部分,得到定種的原核生物僅有5 000多種,其中主要原因就在于自然界存
在的大多數(甚至超過99 o/6)微生物在目前條件下不能或很難在實驗室進
行人工培養,不可能得到其純培養物,所以很難對其進行形態、生理和遺
傳等特性的研究。也就是說,傳統的基于培養的微生物技術在微生物生態
學研究中有很大的局限性,培養基本身實際上具有一定的選擇性,且無法
還原微生物的真實生境;培養過程是一個重新選擇的過程,存在著很多不
確定性,其結果不能反映原始的群落結構。因此,傳統方法只能提供微生
物群落的一小部分信息,不能滿足對微生物整個生態系統的總體認識研究
的需要
現代方法主要是采用分子生物學手段和現代生化分析技術,對自然界
芽孢桿菌的核酸多樣性及細胞組成成分的多樣性進行研究,了解芽孢桿菌
種類的多樣性和在不同環境中的分布規律,常用方法有16S rRNA分析、核
酸探針雜交法、變性劑梯度膠電泳、溫度梯度膠電泳、磷脂脂肪酸分析、
脂肪酸(FA)譜圖以及脂肪酸甲酯(FAME)譜圖分析等。下面介紹兩種比較流
行的方法。
近年來,基于現代生物化學技術發展起來的磷脂脂肪酸分析方法得到
迅速應用。磷脂是幾乎所有生物細胞膜的重要組成部分,細胞中磷脂的含
量在正常的生理條件下是恒定的,約占細胞干重的5%。不同的微生物,PL
FA的種類和數量不同,一些脂肪酸還可能特異性地存在于某些種類微生物
的細胞膜中,因此磷脂脂肪酸可作為微生物群落的標記物。由于磷脂只能
作為活細胞的結構組成,不能作為細胞的貯存物質,在細胞死亡后會很快
降解,因此磷脂只能代表微生物群落中有生命活力的那部分群體,適合于
微生物群落的動態監測。
由于生物體內細胞中磷脂的含量是相對顯著恒定的,因此,PLFA譜圖
的變化是源于樣品中微生物的組成和生物量發生變化。不同菌群的PLFA特
征譜圖不同,在高度專一性基礎上具有多樣性,可以作為微生物群落中不
同群體的標記物。因為各種菌群的微生物生物量和群落組成很難與其他樣
品相同,所以每種樣品具有獨特的PLFA譜圖
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