本文標(biāo)題:"購(gòu)置高倍率的材料顯微鏡觀察30-90nm微粒"
發(fā)布者:yiyi ------ 分類: 行業(yè)動(dòng)態(tài) ------
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購(gòu)置高倍率的材料顯微鏡觀察30-90nm微粒
利用純化膠原蛋白具有體外重組的特性,以乳化法制備含有氫氧基磷灰石粉末之膠原蛋白微粒。
藉由乳化過(guò)程攪拌葉片轉(zhuǎn)速的控制可改變復(fù)合物微粒的大小。
當(dāng)轉(zhuǎn)速由300rpm提升至750rpm,微粒粒徑分布由1600-1700 μm降低至200-600μm。
我們以高倍率的顯微鏡觀察微粒復(fù)合物內(nèi)部氫氧基磷灰石及膠原蛋白纖維的結(jié)構(gòu)與分布,
可見(jiàn)氫氧基磷灰石均勻散布在微膠粒中,纖維直徑分布30-90nm,明暗帶寬度大約50-60nm,
顯示膠原蛋白分子間特殊的排列并未因純化及微粒制備過(guò)程而改變。
在骨母細(xì)胞相容性方面,細(xì)胞在微粒表面培養(yǎng);初始密度2 ×10E4 cells/cm2,培養(yǎng)一周后增加至3.2 ×10E4 cells/cm2;
細(xì)胞活性(MTT)也在一周后增加一倍;骨母細(xì)胞特有堿性磷酸酵素的活性由0.25mmol/hr上升至0.3mmol/hr;
鈣染色法可見(jiàn)鈣化區(qū)域散布在微粒表面。 證實(shí)骨母細(xì)胞在微粒表面仍保有增生、分化及鈣化基質(zhì)的功能。
此外,利用電子顯微鏡及共焦顯微鏡觀察細(xì)胞,其生長(zhǎng)型態(tài)呈現(xiàn)適應(yīng)良好的多角形;
由細(xì)胞核染色可見(jiàn)正在分裂的骨母細(xì)胞;細(xì)胞內(nèi)f-actin的染色可見(jiàn)stress fiber的分布,
顯示細(xì)胞和材料之間具有緊密的連接。 證明此微粒復(fù)合物適合作為骨母細(xì)胞生長(zhǎng)的載體
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